KeratinoSens 시험 (KeratinoSens Assay)
한 줄 정의: 감작성 물질이 각질형성세포의 Keap1-Nrf2-ARE 경로를 켜는지 발광 신호로 측정하는 시험관 시험입니다.
쉽게 풀면
피부에 알레르기를 일으키는 물질이 들어오면 각질형성세포는 방어 유전자를 켜는 경보를 울립니다. KeratinoSens는 이 경보 스위치에 반딧불이 발광 유전자를 연결해 둔 사람 각질형성세포주를 사용합니다. 물질을 처리해 빛이 일정 수준 이상 세지면 감작 가능성이 있다고 봅니다.
왜 중요한가
피부감작 과정의 두 번째 핵심 사건인 각질형성세포 활성화를 동물 없이 평가하는 대표 시험이라, 감작성 대체시험 조합 연구에서 DPRA, h-CLAT와 함께 자주 등장합니다.
논문에서는 이렇게 쓰입니다
"KeratinoSens 시험에서 시험물질은 세포 생존율 70% 이상 농도에서 루시퍼라아제 활성을 1.5배 이상 유도하여 양성으로 판정되었다."
세포가 크게 죽지 않은 조건에서 경보 신호가 기준 이상 커져 양성으로 봤다는 뜻입니다.
조금 더 깊게 보면
친전자성 감작물질은 Keap1 단백질의 시스테인과 반응해 전사인자 Nrf2를 풀어 주고, Nrf2는 항산화 반응 요소(ARE)가 달린 유전자들의 발현을 늘립니다. KeratinoSens 세포에는 ARE 뒤에 루시퍼라아제 유전자가 들어 있어 이 활성화를 빛으로 읽을 수 있습니다. 판정에는 발광 증가 배수, 이를 넘는 농도(EC1.5), 세포 생존율 조건이 함께 쓰입니다. 산화 스트레스를 일으키는 비감작 물질도 신호를 켤 수 있어 위양성 가능성을 고려해야 합니다.
주의할 점
이 시험은 감작 경로 중 각질형성세포 단계만 반영하므로 단독 결과로 감작성을 확정하지 않습니다. 단백질 결합을 보는 DPRA나 수지상세포 활성화를 보는 h-CLAT와 역할이 다릅니다.