h-CLAT (Human Cell Line Activation Test)

한 줄 정의: 사람 단핵구 세포주(THP-1)의 표면 표지자 CD86·CD54 발현 증가로 피부감작 가능성을 평가하는 시험입니다.

쉽게 풀면

피부 알레르기가 생기려면 면역 세포 중 수지상세포가 물질을 알아채고 활성화되어야 합니다. h-CLAT는 수지상세포 대신 비슷하게 반응하는 사람 백혈병 유래 세포주를 물질에 노출시키고, 활성화될 때 늘어나는 표면 단백질 CD86과 CD54를 유세포분석으로 측정합니다. 이 값이 기준 이상 늘면 감작 가능성이 있다고 판단합니다.

왜 중요한가

감작 과정의 세 번째 핵심 사건인 수지상세포 활성화를 반영하는 대체시험으로, 동물실험 없이 감작성을 판단하는 통합 평가 전략 논문에서 필수적으로 다뤄집니다.

논문에서는 이렇게 쓰입니다

"h-CLAT에서 시험물질 처리 시 CD86의 상대형광강도가 150% 이상으로 증가하여 감작성 양성으로 분류되었다."

면역세포 활성화 표지가 기준 이상 늘어 감작 가능성이 있다고 봤다는 뜻입니다.

조금 더 깊게 보면

판정은 세포 생존율이 충분히 유지되는 농도에서 CD86 상대형광강도가 150% 이상이거나 CD54가 200% 이상 증가하는지를 기준으로 합니다. 결과로 얻는 유효 농도 값은 감작 강도를 가늠하는 보조 정보로 쓰이기도 합니다. 물에 잘 녹지 않는 물질이나 세포 표면 형광에 간섭하는 물질은 시험이 어렵습니다. OECD 시험지침 442E에는 비슷한 원리의 다른 시험법들도 함께 수록되어 있습니다.

주의할 점

h-CLAT는 수지상세포 단계만 모사하므로 단독으로는 감작성 판단을 확정하지 않고, DPRA·KeratinoSens 등과 조합해 해석합니다. 세포주는 실제 피부 속 랑게르한스세포와 동일하지 않다는 점도 기억해야 합니다.