면역침강 (immunoprecipitation)
한 줄 정의: 특이 항체로 표적 단백질을 잡아 비드와 함께 가라앉혀 분리하는 기법입니다.
쉽게 풀면
세포를 깨면 수많은 단백질이 섞여 나옵니다. 면역침강은 원하는 단백질에만 붙는 항체와 자석·아가로스 비드를 넣어, 그 단백질만 끌어내리는 '낚시'입니다. 뽑아낸 단백질은 웨스턴 블롯이나 질량분석으로 확인합니다.
왜 중요한가
단백질 발현, 번역후 변형, 상호작용 연구의 기본 도구입니다. Co-IP, ChIP 같은 응용 기법이 모두 이 원리에서 나왔습니다.
논문에서는 이렇게 쓰입니다
"세포 용해물을 항-FLAG 항체로 면역침강한 후 웨스턴 블롯으로 인산화 수준을 분석하였다."
IP 후 검출하는 전형적 흐름입니다.
조금 더 깊게 보면
일반 순서는 세포 용해 → 사전 정제(pre-clearing) → 항체 결합 → Protein A/G 비드 포획 → 세척 → 용출입니다. 동일 종 IgG를 쓴 음성 대조군과 투입 시료(input)를 함께 제시해야 비특이 결합을 판단할 수 있습니다.
주의할 점
공동면역침강법은 결합 상대까지 함께 끌어내는 변형이고, 염색질면역침강법은 DNA 결합 부위를 찾는 변형입니다. 항체 특이성이 결과를 좌우하므로 검증된 항체를 써야 합니다.