Hi-C 염색체 구조 포착 (Hi-C Chromosome Conformation Capture)

생명공학
한 줄 정의: 핵 안에서 물리적으로 가까이 있는 염색질 부위들을 가교결합시키고 서열분석해 유전체 전체의 3차원 접촉 지도를 만드는 기법입니다.
지지된 보에 하중이 작용하는 모습
구조 부재에 하중이 가해지는 기본 개념을 나타냅니다.

쉽게 풀면

DNA는 세포핵 안에서 실이 뭉치듯 접혀 있는데, 실제로는 유전체 서열상 멀리 떨어진 부위끼리도 공간적으로는 맞닿아 있는 경우가 많습니다. Hi-C는 이렇게 서로 맞닿은 부위들을 화학적으로 고정한 뒤 잘라 붙여서, 어느 부위와 어느 부위가 실제로 가까이 있었는지 알아내는 방법입니다. 마치 뒤엉킨 실뭉치를 풀지 않고도 어느 지점끼리 서로 닿아 있었는지 표시해두는 것과 비슷합니다. 이 결과는 흔히 접촉 빈도를 색으로 나타낸 히트맵 지도로 표현됩니다.

왜 중요한가

염색체의 3차원 접힘 구조는 유전자 발현 조절, 인핸서-프로모터 상호작용, 위상연관구역(TAD) 형성과 밀접하게 연관되어 있어 유전체 기능을 이해하는 데 중요한 정보를 제공합니다. 또한 서열만으로는 순서를 정하기 어려운 유전체 조립 단계에서 큰 스캐폴드를 염색체 수준으로 배열하는 데도 핵심 데이터로 쓰입니다.

논문에서는 이렇게 쓰입니다

"Hi-C contact maps revealed disruption of topologically associating domain boundaries following the deletion."

Hi-C 접촉 지도를 통해 결실 이후 위상연관구역 경계가 무너졌음을 확인했다는 의미입니다.

"Contigs were ordered and oriented into chromosome-scale scaffolds using Hi-C proximity ligation data."

Hi-C 근접 결찰 데이터를 이용해 콘티그들을 염색체 수준의 스캐폴드로 정렬하고 방향을 정했다는 의미입니다.

조금 더 깊게 보면

일반적인 실험 과정은 포름알데히드로 염색질을 가교결합시킨 뒤 제한효소로 절단하고, 절단된 말단을 비오틴으로 표지해 재결찰시킨 다음 시퀀싱하는 순서로 진행됩니다. 얻어진 접촉 쌍 데이터는 유전체 상 거리별 접촉 빈도 행렬로 변환되며, 이를 바탕으로 위상연관구역이나 구획(compartment) 같은 대규모 구조를 분석합니다. 유전체 조립 분야에서는 이 근접 정보를 이용해 서로 다른 콘티그가 같은 염색체에 속하는지 판단하는 스캐폴딩 알고리즘의 입력으로 활용됩니다.

주의할 점

Hi-C 접촉 빈도는 세포 집단 전체의 평균적 신호이므로 개별 세포마다 다른 구조를 직접 보여주지는 못하며, 해상도는 시퀀싱 깊이와 사용한 제한효소 절단 빈도에 따라 제한된다는 점을 고려해야 합니다.

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