소혈청알부민 (BSA) (Bovine Serum Albumin (BSA))
쉽게 풀면
BSA는 소 혈액에서 얻은 순수한 단백질로, 항체 실험에서 표적이 아닌 표면에 미리 달라붙어 자리를 채워줌으로써 항체가 엉뚱한 곳에 결합하는 것을 막아준다. 또한 효소나 다른 단백질을 아주 낮은 농도로 다룰 때 용기 벽에 들러붙어 손실되는 것을 막아주는 안정제 역할도 한다. 값이 비교적 저렴하고 순도가 일정해 실험실에서 표준 단백질로도 자주 활용된다. 탈지분유와 함께 대표적인 블로킹 재료로 꼽힌다.
왜 중요한가
웨스턴 블롯, ELISA, 면역조직화학 등 항체를 이용하는 실험은 대부분 비특이적 결합을 얼마나 잘 억제했는지에 따라 결과의 신뢰도가 갈린다. BSA는 이 블로킹 단계를 표준화하는 가장 대표적인 시약이기 때문에, 재현 가능한 프로토콜을 제시해야 하는 논문의 방법(Methods) 섹션에서 빠지지 않고 언급된다. 또한 단백질 정량이나 효소 반응 실험에서 안정제로도 함께 쓰이므로, 생화학·분자생물학 전반의 실험 재현성 논의와 자연스럽게 연결된다.
논문에서는 이렇게 쓰입니다
항체 반응 전 비특이적 결합을 줄이기 위한 블로킹 단계를 설명하는 문장이다.
ELISA 실험에서 항원이 코팅된 웰의 남은 표면을 BSA로 채워 비특이적 신호를 줄이는 과정을 나타낸다.
저농도 단백질이나 효소가 용기 벽에 달라붙어 손실되는 것을 막기 위한 안정제 용도의 사용례를 보여준다.
조금 더 깊게 보면
블로킹의 효과는 사용 농도, 반응 온도와 시간, 그리고 어떤 완충액에 녹였는지에 따라 달라지므로 논문마다 조건이 조금씩 다르게 기술된다. BSA는 탈지분유와 달리 인산화 단백질을 다루는 실험에서 선호되는데, 우유 속에 섞인 카제인 등 인단백질 성분이 인산화 특이 항체와 비특이적으로 반응할 수 있기 때문이다. 또한 실험 목적에 따라 일반 BSA 외에 아세틸화 BSA(acetylated BSA)나 핵산 결합 방지를 위한 변형 BSA 등이 쓰이기도 하며, 어떤 등급과 순도의 BSA를 사용했는지도 결과 재현성에 영향을 줄 수 있다.
주의할 점
인산화 단백질을 검출할 때는 탈지분유 대신 BSA를 사용해야 오검출을 줄일 수 있다.